總糖含量試劑盒說明書微量法

更新時(shí)間：2021-05-27　點(diǎn)擊量：1619

規(guī)格：100管/96樣

總糖含量試劑盒說明書

微量法

正式測(cè)定前請(qǐng)選擇2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)。總糖也可稱為碳水化合物，包括可溶性的單糖，二糖以及不溶性的淀粉，纖維素，幾丁質(zhì)等。

測(cè)定原理：

總糖酸水解為還原糖，在 NaOH 和丙三醇存在下，DNS 試劑與還原糖共熱后被還原成氨基

化合物，在過量的 NaOH 堿性溶液中呈桔紅色，在 540nm 處有最大吸收峰，以此測(cè)定樣品中的總糖含量。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、沸水浴、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、蒸餾水。

試劑的組成和配制：

試劑一：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：液體 5mL×1 瓶，4℃避光保存

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×10mg支，4℃保存；臨用前加入 1mL 蒸餾水溶解，制備 10mg/mL 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液。

樣品中總糖的提?。?/font>

稱取約 0.1g 樣品，加入 1mL 試劑一，1.5mL 蒸餾水，勻漿，95℃水浴中加熱 30min，加入1mL 試劑二，混勻，用蒸餾水定容至 10mL，8000g 25℃離心 10min，取上清液待測(cè)。（注意稀釋，見注意事項(xiàng)）

測(cè)定步驟：

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm，蒸餾水調(diào)零。

2、調(diào)節(jié)水浴鍋至95度。

3、加樣表：

注意：如果ΔA大于3，需要將上清液用蒸餾水稀釋，計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

總糖含量計(jì)算：

以 1、0.75、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0 mg/mL 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液為橫坐標(biāo)，ΔA 為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程 y=kx+b，將ΔA´代入方程得到 x（mg/mL）；

1、按樣本鮮重計(jì)算

總糖含量(mg/g 鮮重)=x×稀釋倍數(shù)×V 提取÷W=10x÷W×T

V 提?。禾崛『篌w積，10 mL；W：樣品質(zhì)量，g；稀釋倍數(shù)：T。

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